他出生于荷兰共和国繁荣的贸易城市代尔夫特，这里是手工技艺与商业活动的中心。在热闹的集市与熟练工匠的环境中长大，使他日后格外崇尚精密的工作与细致的观察。

完成基础教育后，他进入布料与呢绒行业学习，辨别纱线密度与布料质量需要极其敏锐的视力。这种务实训练培养了他严谨检视的习惯，后来几乎自然地转化为显微观察的能力。

他在代尔夫特以呢绒商立足，获得经济稳定与地方声望。商贸环境让他接触到纺织检验用的量具与放大镜片，从而激发了他对光学更深的兴趣。

他与芭芭拉·德·梅成婚，在经营店铺与履行市政职责的同时开始家庭生活。此后的人生中，个人的失去与责任并未减缓他稳定而持续的观察与通信。

他获得市政职位，担任治安官署的管事，进一步融入代尔夫特的城市行政体系。该职位带来收入、地位与人脉，使他得以在私下投入耗时的实验与制作。

他开始通过打磨与抛光微小镜片，并将其固定在金属板上，制作强力的单透镜显微镜。凭借工匠技艺与不懈改进，他实现的放大倍率令后来的研究者也感到惊叹。

通过中间人的联系，他将第一批详尽观察寄往英国皇家学会，开启了延续数十年的通信。学会秘书亨利·奥登堡识别出其新颖之处，并鼓励他继续报告。

他检查当地池塘与运河的水样，描述了后来被识别为原生生物的微小运动体。他生动的荷兰语报告被译介给伦敦读者，挑战了人们对生命尺度与多样性的既有想象。

他在胡椒水浸液中观察到极其微小的微小动物，如今被确认是细菌。由于主张令人难以置信，英国皇家学会要求他人复核，这成为早期科学重复验证的重要案例。

他检查动物与人类的精液并报告具有运动性的精子细胞，为生殖理论增添了颇具冲击的新证据。这些发现加剧了欧洲各地关于预成论与渐成论的争论。

他长期持续的严谨书信与引人注目的绘图使他当选为英国皇家学会会士。尽管缺乏系统的正规教育且以荷兰语写作，他仍成为欧洲自然哲学界受尊重的贡献者。

他从牙齿上刮取沉积物，描述了口腔中密集成群的微生物，这是对人体微生物群的早期一瞥。他的叙述把日常卫生与不可见的生物世界联系起来，令读者难以忽视。

许多重要访客专程前往代尔夫特观看他的仪器与演示，使他的声誉超越书信传播。这些展示帮助他在怀疑者面前为自己的观察提供佐证，尤其反驳了单透镜显微镜不可能如此强大的质疑。

他利用薄组织与小动物，报告了红细胞以及血液在极细小血管中的流动。他的显微观察与血液循环理论相互补充，揭示了连接动脉与静脉的微小通道。

在大使团式的欧洲考察中，俄国沙皇彼得一世访问代尔夫特，向技艺精湛的工匠与研究者求教实用知识。列文虎克的演示契合彼得对技术、造船与现代科学方法的兴趣。

他不断精炼自己的观察写作方式，提交更长的书信，并附上更清晰的组织、昆虫与微观结构图。英国皇家学会的出版物将这些报告传播至欧洲各地，塑造了早期显微观察的规范。

随着显微研究的兴趣升温，翻译与汇编使他的荷兰语书信更容易被法语与英语读者理解。更广的传播范围帮助微生物成为医生与博物学者认可的研究对象。

他在代尔夫特去世，生前寄出数百封书信，以罕见的严谨与耐心记录微观生命。他的仪器与笔记影响了后来的生物学与医学人物，使显微观察牢牢扎根于经验实践之中。